Immunsystemet vagter

Immunsystemet vagter

Zoltan Fegervari, Shimon Sakaguchi
"I verden af ​​videnskab" №12, 2006

Om forfatterne

Zoltan Fegervari (Zoltan Fehervari) og Simon Sakaguchi (Shimon Sakaguchi) begyndte at arbejde sammen i 2000, da Fegervari, efter at have forsvaret sin doktorsafhandling, fik et sted i Sakaguchi laboratoriet ved Institut for Avanceret Medicinsk Forskning ved Kyoto Universitet i Japan. Nu arbejder Fegervari i Institut for Patologi ved University of Cambridge, hvor han forbereder sig på at forsvare en afhandling inden for immunologi. Professor Sakaguchi har i øjeblikket ansvaret for den eksperimentelle patologi afdeling i Kyoto.

lovgivningsmæssige Tceller holder kroppens immunsystem fra at angribe sine egne væv. Deres anvendelse vil tillade at behandle en række sygdomme og muligvis løse problemet med afvisning af transplanterede organer.

Så snart immunforsvaret begynder at misbruge sine våben, regulerer T-celle (T-reg) står i sin vej (billede fra webstedet www.sciam.ru)

"Alvorlig autotoksikose" – dette udtryk blev introduceret for hundrede år siden af ​​den berømte tyske bakteriolog Paul Ehrlich for at beskrive den patologiske tilstand, hvor en persons immunsystem "angriber" sine egne organer og væv.Ehrlich mente, at fra et biologisk synspunkt er autoimmunitet (en anden definition indført af ham) ikke absurd, når den er under streng kontrol. Det medicinske samfund accepterede imidlertid ikke en sådan tvetydig ide. Faktisk, hvorfor skal naturen i menneskekroppen bygge en mekanisme, der kan ødelægge dens luftfartsselskab?

Men læger fra tid til anden står overfor sygdomme, der falder ind under begrebet Ehrlich. Blandt dem er multipel sklerose, insulinafhængig diabetes, reumatoid arthritis. Det har vist sig, at i sådanne patienter, funktionen af ​​specifikke hvide blodlegemer, kendt som CD4+-T-Lymfocytter (de er så navngivet, fordi de modner i tymkirtlen, kirtlen ligger i brystet lige over hjertet og bærer glycoproteinmolekyler på deres overflade CD4). Normalt spiller de rollen som "højtstående officerer", som beordrer andre celler i immunsystemet til at angribe de invaderende fjender, patogener, men nogle gange sender våben mod organer og væv i deres egen krop.

Erlich havde ret i en anden: for nylig identificerede celler,specialiseret i at komme tilbage på vejen for immunforsvarets sande lydighed. De kaldes lovgivningsmæssige T-celler. At være en del af en befolkning CD4+-Tceller, opretholder de fred og harmoni mellem immunsystemet og kroppen. Derudover viste det sig, at ikke kun fredsbevarende funktion er særegen for dem: de påvirker også immunsystemets reaktion på de smittefarlige midler, som har trængt ind i kroppen, tumorcellerne, transplanterede organer, fosterceller under graviditet osv. Hvis du kan finde ud af, hvordan de udfører deres ansvar og hvorfor deres arbejde til tider svigter, vil forskerne kunne kontrollere disse regulators aktiviteter og om nødvendigt undertrykke immunaktivitet.

Upåliteligt forsvarssystem

Mange mennesker i dag er bange for at erkende, at immunforsvaret til enhver tid kan komme ud af kontrol og fremkalde en autoimmun sygdom. Hvad der er mest ubehageligt er, at et sådant "immunologisk sværd af Damocles" ikke er så svært at sætte i gang. For eksempel, når mus injiceres med proteiner i deres eget centralnervesystem sammen med nogle adjuvanser (ikke-specifik immunogenesestimulator)en destruktiv immunreaktion opstår, der hovedsagelig manifesterer sig som multipel sklerose, hvilket forårsager ødelæggelse af hjernen og rygmarven.

Ved at indføre deres egne proteiner af forskellig oprindelse til dyr, kan andre autoimmune reaktioner udløses. Den samme fare lurer og mand. I det mindste er autoreaktive celler i immunsystemet, som in vitro opfører sig ekstremt aggressivt mod deres egen organismeres væv, isoleret fra blodet af helt sunde mennesker.

Hvorfor, hvis der er en konstant trussel fra vores eget immunsystem, lider de fleste af os ikke af autoimmune sygdomme? Hvordan skelner vores interne forsvar farlige mikrober fra kroppens normale celler? Forskere har fundet ud af, at mange forholdsregler træffes for at sikre selvtolerance (evnen til at holde immunsystemet på plads). Den første forsvarslinje, alligevel, så vidt som Tceller, der ligger i thymus. Ripe her Tceller gennemgår en seriøs "studiekursus" og indstiller sig til et ekstremt svagt respons på sunde celler fra værtsorganismen. Celler, der ikke kan "trænes" afvises.Imidlertid er intet system immun mod fejl, og et antal auto-aggressive Tceller undslipper kontrol. En gang i blodbanen og lymfe skaber de truslen om en autoimmun reaktion.

Blod og lymfe repræsenterer en anden forsvarslinje. Det bruger flere teknikker. Nogle væv, herunder hjerne og rygmarv, er indhegnet fra immunaggressive celler i immunsystemet ved at et lille antal skibe fører til disse organer. En sådan selvisolering kan imidlertid ikke være fuldstændig. På grund af visse omstændigheder (for eksempel hvis væv er beskadiget), kan autoreaktive celler stadig trænge indad. Andre beskyttelsesmetoder er proaktive. Immunkeller, der udviser mistænkelig interesse for raske væv og organer, angribes af andre komponenter i immunsystemet og destrueres eller inaktiveres af dem.

Tilsyneladende hører blandt de "divisioner" involveret i proaktive tiltag den centrale rolle i lovgivningen T-celle. De fleste af dem (og måske alle) lærer færdigheder i thymus, og spredes derefter i hele kroppen som en specialiseret subpopulation. T-celler.

Historien om opdagelsen af ​​lovgivningen T-celler

I 1969, Yasuaki Nishizuka (Yasuaki nishizuka) og Teruye Sakakura (Teruyo Sakakura) fra det japanske kræftforskningscenter i Nagoya fandt ud af, at fjernelsen af ​​thymus hos de nyfødte hunmus fører til alvorlige konsekvenser – ødelæggelsen af ​​æggestokkene. I starten foreslog forskere, at thymus udskiller hormoner, der er nødvendige for udvikling og bevarelse af disse organer. Imidlertid viste det sig senere, at æggene i æggestokkene hos mus, der manglede thymus, oversvømmes bogstaveligt talt med immunceller, hvilket angav tilstedeværelsen af ​​en autoimmun sygdom som følge af manglende reguleringsmekanisme. Det var nødvendigt at introducere normale gnavere Tceller som sygdommen receded. Alt viste det i befolkningen T-burer har et selvovervågningssystem.

Det ligner T-regmusekage (foto fra cmbi.bjmu.edu.cn)

I begyndelsen af ​​1970'erne. Lignende resultater i forsøg på voksne rotter blev opnået af John Penhale (John penhale) fra Edinburgh University, og Richard Gershon (Richard Gershon) fra Yale University for første gang foreslog, at der er en bestemt gruppe Tceller, der er i stand til at undertrykke immunresponsen, herunder mod kroppens væv.De hypotetiske celler blev kaldt suppressorceller, men på den tid kunne ingen finde en forklaring på deres adfærd.

De største forhåbninger var fastgjort på påvisning af specielle strukturer på overfladen. Tceller – markører for hvilke suppressoren Tceller kunne skelnes fra andre komponenter i immunsystemet. Siden midten af ​​1980'erne. Mange molekyler er blevet testet for rollen som en potentiel markør. Til sidst opdagede en af ​​os (Sakaguchi) i 1995 – det viste sig at være et molekyle kaldet CD25. Når musene blev fjernet CD4+-T– Cellerne, der bærer denne markør, blev adskillige organer straks udsat for immunforsvar: mave, køn, spytkirtel, skjoldbruskkirtlen og bugspytkirtlen. Hvide blodlegemer skyndte sig til dem og ødelagde dem.

Anmeldelse: Immune Regulators

  • I lang tid troede immunologer ikke på eksistensen af ​​celler med speciale i at undertrykke overdreven aktivitet af immunsystemet. Der er dog virkelig – de kaldes regulatoriske Tceller (T-reg).
  • T-regceller undertrykker ikke kun den autoimmune reaktion, men hjælper også kroppen med at modstå geninfektion af patogene mikrober, beskytte de gunstige bakterier, der bevarer tarmene fra ødelæggelse og bidrage til det normale forløb af graviditeten.Men de har også negative egenskaber: de hjælper kræftceller til at undgå et angreb fra immunsystemet.
  • Resultaterne af nyere studier giver håb om oprettelsen af ​​nye behandlinger for autoimmune sygdomme og kræft. Det er også muligt at T-regceller vil lindre patienter, der har gennemgået organ- eller vævstransplantation fra et livslangt indtag af immunosuppressive midler.
  • En vigtig bekræftelse på, at vi er på rette spor, var følgende forsøg. Vi har tildelt en befolkning Tceller af en normal mus fjernede det meste af det CD4+-CD25+-Tceller, og derefter blev det resterende materiale injiceret i gnavere med et ikke-fungerende immunsystem, hvilket førte til udviklingen af ​​deres autoimmune sygdom. Jo mindre CD4+-CD25+-Tceller forblev i T– cellepopulationen indført af forsøgsdyr, jo bredere omfanget af autoimmune sygdomme fører til forsøgsdyrs død. Med introduktionen af CD4+-CD25+-Tceller selv i små mængder immunitet blev restaureret og beskyttet kroppen fra selvdestruktion. Immunologer begyndte at ringe CD4+-CD25+Tregulatoriske celler (eller simpelthen T-reg) tilsyneladende vil fjerne den forvirring, som definitionen af ​​"suppressor" forårsagede.

    Hvordan virker de? T-regcelle-?

    Mekanismen for undertrykkelse af autoimmun aktivitet af celler T-reg forbliver et mysterium. Tilsyneladende er de i stand til at handle på en række celler i immunsystemet, blokere deres amplifikation og processer som sekretion af signalmolekyler – cytokiner. Specialister har tendens til også at tænke på det T-regceller aktiveres ved direkte celle-interaktion. I alle andre henseender forbliver billedet uklart.

    Selvtolerance mekanisme (billede: "I videnskabens verden")

    Men for nylig vores laboratoriepersonale ved Kyoto University, samt Alexander Rudensky (Alexander Rudensky) med kolleger fra University of Washington og Fred Ramsdell-gruppen (Fred ramsdell) fra virksomheden CellTech R & D i stykker Washington opnåede selvstændigt resultater, der øgede sløret om hemmeligholdelse over uddannelse og handlingsmekanismen. T-reg. Det blev fundet, at de indeholder i et usædvanligt stort antal specifikke molekyler, der kaldes Foxp3, som tjener som en af ​​transkriptionsfaktorerne, som regulerer visse geners arbejde og dermed syntesen af ​​proteinerne kodet af dem. Ændringer i udtrykket af et hvilket som helst cellulært gen kan påvirke funktionen af ​​hele cellen. Hvad angår aktionsfaktoren Foxp3så synes det at re-align cellulære gener på en sådan måde som Tceller bliver til T-reg. Faktisk introduktionen Foxp3 i almindelighed Tceller fører til, at de får den samme kapacitet til immunosuppression som den originale high-grade T-regi-celler dannet i thymus. For nylig viste det sig, at mus tilhører en meget brugt laboratorielinje Scurfysyntetiser kun inaktiv, mutant form for protein Foxp3men der er ikke spor i deres krop T-reg. Immunsystemet i sådanne dyr rystes til grænsen, de lider af flere betændelser i forskellige organer og dør tidligt.

    Er der noget bevis for, at en person også er nødvendig T-regcelle-? Og er de i vores krop? Forskerne fandt, at de molekylære egenskaber karakteristisk for T-reg-Roats er også iboende i nogle subpopulation. Thumane celler. Molekyler er til stede på overfladen af ​​disse celler. CD25, og indeni indeholder en usædvanlig stor mængde protein Foxp3. De har immunosuppressive egenskaber – i det mindste er disse resultaterne af forsøg. in vitro.

    hvordan T-regceller undertrykker den autoimmune reaktion (billede: "i videnskabens verden")

    Det bedste bevis på, at disse celler er vigtige for os, er følgende observation. Der kaldes en sjælden genetisk sygdom IPEX (Immun dysregulering, Polyendocrinopati, Enteropati, X-linked syndrom), som er forbundet med en mutation i et af generne X-kromosomer og strejker mandlige babyer (i modsætning til piger, arver de kun en X(kromosom og kan derfor ikke syntetisere en anden, normal kopi af det tilsvarende protein). Dens konsekvens er en autoimmun reaktion, der medfører nederlag i mange organer og død i barndommen. Som det viste sig for nylig er denne mutation lokaliseret i det samme gen, som koder for et protein Foxp3. således IPEX – dette er en autoimmun human sygdom, der ligner den hos mus i linjen Scurfy.

    Ikke kun selvtolerance

    Så der er tegn på, at T-regA-celler forhindrer faktisk udviklingen af ​​autoimmune sygdomme hos mennesker, men deres rolle var endnu mere signifikant. Så deltager de i kroppens reaktion på mikrobernes indtrængning.

    I 1990'erne. Fiona Pauri (Fiona Powrie) af DNAX, Forskningsinstitut i Palo Alto, pcs. Californien, udførte eksperimenter om indførelsen af ​​befolkningen Tceller udtømt T-reg, mus med et ikke-fungerende immunsystem. I en af ​​en række forsøg udviklede dyr akut tarmbetændelse.Men det afvigende immunrespons var ikke primært rettet mod cellerne i selve organet.

    I tarmene hos både gnavere og mennesker er der mange mikroorganismer. Ofte overstiger deres antal en billioner pr. Gram væv. De fleste af dem er ikke kun harmløse, men endda nødvendige: de forbedrer fordøjelsen og undertrykker patogene bakterier (for eksempel salmonella), som ellers ville kolonisere tarmene. Normalt reagerer immunsystemet ikke på tilstedeværelsen af ​​nyttige, selvom fremmedlegemer. Men i de mus, som Powri brugte i sine eksperimenter, var det ikke tilfældet. Indførte immunceller angreb ikke kun mikroorganismer, men også modtagerens tarmvæg. Men med celleinjektion T-reg der var ikke sådanne problemer. Og hvis sidstnævnte blev introduceret med andre Tceller fra starten, ville der ikke være nogen inflammatorisk proces i tarmen. Sammenfattende kan vi sige, at immunsystemet er en triggermekanisme, som er klar til et øjeblik for at angribe den intestinale mikroflora og kun holde den tilbage T-reg-celle.

    Immunsystemets reaktion på patogene fremmedlegemer kan overvåges på lignende måde. På den ene side T-regceller er i stand til at blokere for stærk en reaktion på den anden side – for at forhindre ødelæggelsen af ​​nogle fremmedlegemer, så det kan eksistere i værtsens krop. Der er f.eks. Bevis for, at manglende evne til fuldstændigt at ødelægge en bakterie, der lever i maven Helicobactor pilorider forårsager peptisk ulcus sygdom, er forbundet med en "pacificerende" handling T-regceller på immunsystemet.

    T-reg i sig selv hæmmer andres aktivitet Tceller (billede: "I verden af ​​videnskab")

    Værker af David Sachs (David Sacks) og hans kolleger fra National Institutes of Health illustreret situationen kompleks. Faktum er, at ifølge forfatterne har den ufuldstændige ødelæggelse af patogener i kroppen en positiv side. Det følgende eksperiment blev udført: mus blev inficeret med parasitter, der var sikre for dem. Selv om dyrenes immunsystem var sund, forblev et lille antal mikroorganismer i deres kroppe, og den anden infektion modtog en passende rebuff. Hvis befolkningen Tcelle var dårlig i celler T-reg, parasitterne blev ødelagt af en og alle, men da de blev smittet igen, var immunresponsen så svag, som om gnavere af organismen aldrig havde mødt disse parasitter. T-regceller ser ud til at forbedre immunologisk hukommelse, som sikrer kroppens immunitet mod reinfektioner og ligger under vaccines virkning.

    Der er tegn på, at cellerne T-reg bidrage til det normale (fra et immunologisk synspunkt) graviditeten, som altid viser sig at være en udfordring for immunsystemet. Da fosteret arver fra moderen kun halvdelen af ​​generne og modtager anden fra faderen, er den ikke genetisk identisk med moderen og kan i det væsentlige betragtes som et implanteret organ. Fosteret er beskyttet mod afvisning ved hjælp af en række mekanismer, der fungerer i trofoblast (placentavæv, som forbinder embryoet med livmoderen). En trofoblast er ikke kun en fysiologisk barriere for stoffer, der er skadelige for fosteret i moderblod: det producerer immunosuppressive molekyler.

    Under graviditeten undergår den fremtidige moders immunsystem ændringer. Der er tegn på, at kvinder med en autoimmun sygdom som multipel sklerose under graviditeten T-regceller er meget aktive. For nylig modtaget yderligere data: Alexander Betz (Alexander Betz) fra University of Cambridge fandt ud af, at antallet af moderceller blev forøget hos gravide mus T-reg. Desuden i genetisk modificerede personer, der ikke har T-reg, når der bæres afkom, er der massiv indtrængning af immunceller gennem placenta barrieren. Der er grund til at tro, at årsagen til spontane aborter hos nogle kvinder er lav aktivitet. T-reg-celler.

    Anvendelse af T-regceller i medicin

    således T-regceller er en kraftig naturlig regulator af immunsystemet. Efter at have lært at påvirke sit arbejde, vil vi være i stand til at helbrede forskellige sygdomme. Det er selvfølgelig ikke nødvendigt at forvente øjeblikkelig praktisk gennemførelse af en sådan metode til behandling af lidelser, men de foreliggende data tillader os at håbe T-regi-celler eller lægemidler, der påvirker deres aktivitet, vil snart kunne lindre tilstanden hos nogle patienter.

    Det handler primært om autoimmune sygdomme. Måske ved T-reg– celler kan også klare forskellige typer af allergier. Og letheden med hvilke celler T-reg "Pacify" immunsystemet, tyder på, at de kan blive uundværlige for organtransplantationer.

    Fremtiden for transplantologi (billede fra www.sciam.ru)

    En alternativ metode kunne være at selektivt fjerne visse komponenter fra en befolkning. T-regceller for at undertrykke uønsket immunosuppression og derfor for at forøge responset rettet mod det ønskede mål. Det bedste ville være at fjerne kun dem T-regceller, der blokerer for et specifikt immunrespons. En sådan strategi kan være uundværlig i bekæmpelsen af ​​smitsomme sygdomme, hvor immunsystemet til sig selv ofte ikke virker ret tilstrækkeligt, fx i tuberkulose og aids.

    Reduceret aktivitet T-regceller kunne også anvendes til behandling af onkologi. Immunsystemets komponenter, der cirkulerer i blodet og lymfe, overvåger tilsyneladende udseendet i kroppen af ​​celler, som er blevet cancer. De genkender dem ved visse morfologiske træk og klassificerer dem som udenlandske agenter. Ved at blande sig med immunsystemets patruljer til at gøre arbejde, T-reg bidrager uundgåeligt til dannelsen og væksten af ​​tumoren. I nogle onkologiske sygdomme hjælper de berørte celler endda celler i dette. T-reg: De udskiller signalmolekyler, som kan tiltrække T-reg og indlede omdannelsen af ​​ikke-T-reg i T-reg. Ifølge observationer fra nogle læger har kræftpatienter et unormalt højt indhold af aktive T-regceller i blodet og i selve tumoren.

    Tekniske vanskeligheder

    Indtil nu har der ikke været forsøg på at oprette stoffer, der øger eller formindsker befolkningsstørrelsen. T-regceller direkte i menneskekroppen. Ethvert middel, som kunne anvendes, kunne kun påvirke disse subpopulationer. T-regceller, der spiller en rolle i udviklingen af ​​en specifik sygdom. Men hvordan man genkender sådanne celler, kender eksperter endnu ikke.

    optioner T-reg-Terapienheden

    De her anførte metoder gennemgår allerede kliniske forsøg eller er under forberedelse. De fleste af de testede stoffer virker på T-regceller rettet mod deres ødelæggelse eller undertrykkelse af aktivitet. Indførelsen af ​​sådanne stoffer i kroppen kræver særlig pleje – med en overdosis er udviklingen af ​​en autoimmun sygdom mulig

    Manipulationer med T-reg-cellerSygdommenPrincippet om drift
    Suppression af aktivitet eller ødelæggelse (for at forbedre immunresponset)Hudkræft (melanom), æggestokkene, nyrerneToksinet er fastgjort til interleukin-2, hvilket sikrer dets indtrængning i T-reg-celle. Monoklonale antistoffer indføres, der kan ødelægge T-regceller eller blokere deres indtrængning i tumoren
    Spredning i patientens krop (for at undertrykke immunresponset)Multipel sklerose, psoriasis, Crohns sygdom, insulinafhængig diabetes mellitusForbered en vaccineholdig bestanddel. Tcelle receptor for at stimulere proliferation T-reg-celler
    proliferation in vitro og introduktionen til patientenGraft-versus-vært reaktion (immunceller af den transplanterede knoglemarv angriber modtagerens væv)dyrkede T-regdonorceller med specifikke antistoffer og vækstfaktorer. Indtast den resulterende befolkning T-regceller forud for eller under knoglemarvstransplantation (for at forhindre afvisning) eller når en graft-versus-vært-sygdom trues

    Udvikling af metoder baseret på virkninger på T-reg in vitro, udgør også et alvorligt problem. Det sværeste er at få nok celler. Selvom nogle T-reg– celler kan arbejde fuldt udselv om de er i et væsentligt mindretal i forhold til dem, for hvilke de har en suppressorvirkning, kan der være behov for titusindvis af mennesker for effektivt at behandle en autoimmun sygdom. T-reg-celler. Isolering af et sådant antal af disse sjældne elementer fra patientens blod virker umuligt. Og det ser ud til at uden at udvikle en forstærkningsmetode T-reg in vitro kan ikke gøre her.

    Heldigvis kan problemet med "store tal" løses på en anden måde. Forskellige forskergrupper har fundet ud af, at celler med en immunosuppressiv virkning kan skabes i forholdsvis store mængder ved at behandle normal Tceller med en blanding af visse kemikalier. Kaldes sådanne celler Tr1søgt efter T-regceller er endnu ikke klare, men de har utvivlsomt udtalt immunosuppressive egenskaber.

    Nu, at eksperter ved det Foxp3 fungerer som et nøglemolekyle der styrer udviklingen og funktionen T-reg, kan du forsøge at få det ønskede antal regulerende celler ved hjælp af standard laboratoriemetoden for genoverførsel Foxp3 i flere talrige, og derfor udvindes med mindre vanskeligheder Tceller af en anden type. Nu arbejder mange forskere på denne metode, herunder mig. Først og fremmest er vi interesserede i hvilke molekylære processer indleder proteinsyntese. Foxp3 under udvikling T-reg. Måske har man forstået dette spørgsmål, det vil være muligt at oprette medicinske stoffer, hvis modtagelse vil gøre det unødvendigt at isolere de tilsvarende celler, ændre dem og indføre dem i kroppen.

    Hvad angår organtransplantation, er en anden metode til opnåelse af T-regceller med de ønskede egenskaber. Det sørger for fjernelsen T-reg fra patientens legeme, der skal transplanteres, og deres dyrkning sammen med cellerne i donorens tilsvarende organ. Formålet med denne procedure er at opnå T-regceller med unikke evner til at undertrykke afvisning. En af os (Sakaguchi) viste, at en enkelt injektion af sådanne celler under hudtransplantation er nok til, at den transplanterede klap fuldt ud kan tage rod. Det skal også bemærkes, at den beskrevne procedure efterlader modtagerens immunsystem intakt uden at mindske dets evne til at modstå smitsomme og andre sygdomme.

    I løbet af de sidste ti år har ideer om, hvordan kroppens forsvarssystem fungerer, gennemgået væsentlige ændringer. Især blev det klart, at selv om det tillader omsætning i blodet og lymfepotentialet selvdestruktivt Tceller, det giver også uddannelse Tceller, der styrer sidstnævnte. Find ud af, hvordan sådanne regulerende celler virker, og hvorfor de har så høj immunosuppressiv aktivitet, vi kan bruge dem til at behandle mange dødelige sygdomme. Tillader at ødelægge "fremmede" og strengt bevogtede "hans" T-regceller tjener som ægte fredsskabere af immunsystemet.


    Like this post? Please share to your friends:
    Skriv et svar

    ;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: